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手把手教你如何用擬南芥培養箱培養擬南芥
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更新時(shí)間:2021-10-26
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擬南芥作為高等植物的模式生物被世界的植物生物學(xué)實(shí)驗室廣泛研究。擬南芥培養箱可用于基因表達、器官發(fā)育、基因突變等研究。然而,怎么培養好這種小植物可能不是那么容易。
擬南芥培養箱培養擬南芥步驟:
1、首先把擬南芥種子放到濾紙上,用70%酒精進(jìn)行消毒處理,再用*進(jìn)行處理(也可選擇20%漂白劑以及0.05%TritonX-100非離子表面活性劑做殺菌處理20分鐘)。用無(wú)菌水沖洗5遍,然后將種子點(diǎn)到MS培養基上,pH5.9,另加0.9%瓊脂以及2%蔗糖。
2、把種子放到冷光源培養箱中,設置4℃黑暗條件下進(jìn)行春化48h-72h左右,在長(cháng)日照或短日照條件下催芽。利用PLC控制器,編輯簡(jiǎn)單的晝夜模式,設定光照時(shí)間16小時(shí)(黑暗8小時(shí))或者光照14小時(shí)(黑暗10小時(shí));選配Q23+連續光強調節裝置,設定光照強度為100-150umol/m2.s;設定室內溫度為光照條件下20-22℃,黑暗條件下18-20℃;選配濕度控制系統,設定室內相對濕度70%。
3、出苗大約7~10天,然后移入土中培養,采用底部灌溉方式澆水(利用土壤的毛細作用)。在澆水前,可使土壤*干燥,以后每隔7~10天澆一次水。
4、土壤可用營(yíng)養土、蛭石以及珍珠巖比例10:1:1的比例配置,也可直接用堆肥、蛭石以及草炭等進(jìn)行混合。在生長(cháng)過(guò)程中,可用普通的花肥施肥一次或者不施肥。
5、當植株長(cháng)到一定高度時(shí),可剪斷莖桿,以產(chǎn)生更多的花序,可用于轉化研究或者獲得更多的種子
擬南芥培養箱特殊培養:
為了加快擬南芥生長(cháng)速度,在移入土壤培養后,可設定長(cháng)日照,利用PLC控制器,編輯程序設定24h光照,光強100-250umol/m2.s,溫度持續22-23℃。
擬南芥根系處理培養,可減少光照時(shí)間為8-12h,提高光照強度為100-350umol/m2.s,溫度為光照條件下22-23℃,黑暗條件下18-20℃,其余培養條件同正常培養。