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二氧化碳培養箱的使用要點(diǎn)及注意事項
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更新時(shí)間：2022-06-27
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二氧化碳培養箱是醫院實(shí)驗室普遍使用的常規儀器之一。二氧化碳培養箱能在箱體內模擬形成一個(gè)細胞、組織在生物體內的生長(cháng)環(huán)境。箱內具有恒定的酸堿度(pH值:7.27.4)、穩定的溫度(37℃)、較高的相對濕度(95%)、穩定的CO2水平(5%)。本文介紹了二氧化碳培養箱的正確使用方法和注意要點(diǎn)。
一定要做好使用前的準備工作：
二氧化碳培養箱應由專(zhuān)人負責使用，操作盤(pán)上的任何開(kāi)關(guān)和調節旋鈕一旦固定后，不要隨意扭動(dòng)，以免影響箱內溫度，二氧化碳濃度、濕度的波動(dòng)，同時(shí)降低機器的靈敏度。箱子的放置要水平，避免陽(yáng)光直射和灰塵等，要保證儀器周?chē)臍饬餮h(huán)，后部及側面應留出5cm的空隙。加裝穩壓電源保證電源電壓波動(dòng)不超過(guò)220V+10%。所加入的水必須是蒸餾水或無(wú)離子水，防止礦物質(zhì)儲積在水箱內產(chǎn)生腐蝕作用，經(jīng)常檢查箱內水是否足夠，水位應加至“水位指示燈”滅燈時(shí)為止。使用前箱內應用消毒酒精或碘溶液*擦洗，防止其他微生物污染，導致實(shí)驗失敗。在房間安裝空調，使環(huán)境溫度保持在25度左右。所使用的二氧化碳必須是純凈的，否則降低二氧化碳傳感器的靈敏度和污染二氧化碳過(guò)濾裝置。
正確充氣延長(cháng)二氧化碳傳感器使用壽命：
二氧化碳培養箱箱內氣壓由二氧化碳氣體傳感器控制。二氧化碳傳感器正常反饋要求進(jìn)氣壓為0.06MPa。當箱內氣壓降低時(shí)，二氧化碳傳感器在低壓刺激下有節奏地開(kāi)閉，向箱內慢慢充氣，當進(jìn)氣壓達0.1MPa時(shí)，自動(dòng)停止調節。如充氣方法不當，使進(jìn)氣壓力增大，當超過(guò)0.1MPa甚至0.2MPa壓力，會(huì )損傷二氧化碳傳感器。開(kāi)始這種損傷效應不明顯，不易察覺(jué)，反復錯誤操作，二氧化碳傳感器損傷累積最終致命損壞，使氣壓調節失靈。因此，二氧化碳傳感器壽命與二氧化碳進(jìn)氣壓大小有關(guān)，只要做好進(jìn)氣壓調節，就能保護二氧化碳傳感器性能。二氧化碳傳感器價(jià)格昂貴，更換不易，所以一定要做好進(jìn)氣壓調節，延長(cháng)二氧化碳傳感器使用壽命。
做培養時(shí)注意培養箱濕度：
箱內濕度對于培養工作來(lái)說(shuō)是一項非常重要然而又經(jīng)常被忽略的因素。因為飽和濕度環(huán)境可以避免培養液中二氧化碳逃逸，培養液中ph值穩定，有利用細胞生長(cháng)，足夠的濕度水平并且要有足夠快的濕度恢復速度(如在開(kāi)關(guān)門(mén)后)才能保證不會(huì )由于過(guò)度干燥而導致培養失敗。所以二氧化碳培養箱使用過(guò)程中，在箱內托盤(pán)中放一定量的滅菌水(3/2至全盤(pán))，使箱內成為飽和濕度環(huán)境如使用者忘記不加水，使培養細胞處于低濕度甚至干熱環(huán)境中，培養液二氧化碳氣體易揮發(fā)，液體PH值升高，影響細胞生長(cháng)，在工作中要力求避免此問(wèn)題發(fā)生。樣本多時(shí)，箱內分區存放，培養物用筐或瓷盤(pán)存放，這樣存取快速，縮短開(kāi)門(mén)時(shí)間，減少箱內氣體和濕度變化，節省氣體，穩定了細胞生長(cháng)環(huán)境。
防止二氧化碳培養箱污染做好箱內消毒：
二氧化碳培養箱污染是導致細胞培養失敗的一個(gè)主要因素，所以要減少和防止污染的發(fā)生，主要途徑是盡量減少微生物可以生長(cháng)的區域和表面，采取消毒措施。例如，針對箱內濕熱環(huán)境易滋生細菌等問(wèn)題，我們采用在1000ml水中加2ml新潔而滅液，定期用酒精和紫外線(xiàn)消毒箱內空氣，培養物酒精擦拭入箱內，盤(pán)里的水至少要一周換一次，控制污染，可以維持適應的蒸發(fā)作用，減少箱內微生物滋生速度。為了培養箱免受污染并且保證儀器箱體內的生物清潔性，有些二氧化碳培養箱設計了自動(dòng)排除污染裝置來(lái)有效防止污染的產(chǎn)生。目前有多種消毒滅菌方式，如帶有紫外消毒功能CO2培養箱。還有的設計生產(chǎn)了HEPA過(guò)濾器能過(guò)濾培養箱內空氣，可過(guò)濾除去99.97%的0.3um以上的顆粒，此外，還有設計了能使箱內達到高溫濕熱的環(huán)境從而殺死污染微生物，達到消毒滅菌目的培養箱。