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擬南芥培養箱普通的培養和特殊培養方法
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更新時(shí)間:2016-04-26
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擬南芥又名阿拉伯芥,屬十字花科,為二年生草本植物。具有植株形態(tài)小,平鋪直徑5cm,高30cm;生長(cháng)區域小,易于培養;基因組小,只有5條染色體,15700萬(wàn)個(gè)堿基對,27000個(gè)基因;生長(cháng)速度快,周期短,一個(gè)世代大約只需要6周的時(shí)間;可自花授粉,也可以在不同種質(zhì)系間雜交,種子多,每株每世代可產(chǎn)數千粒種子等特點(diǎn)。因此,擬南芥是植物科學(xué),包括遺傳學(xué)和植物發(fā)育研究中的模式植物之一。在2000年,擬南芥成為了*個(gè)基因組被完整測序的植物。
擬南芥培養箱簡(jiǎn)單的培養,可用于基因表達、器官發(fā)育、基因突變等研究。
1、首先把擬南芥種子放到濾紙上,用70%酒精進(jìn)行消毒處理,再用*進(jìn)行處理(也可選擇20%漂白劑以及0.05% Triton X-100 非離子表面活性劑做殺菌處理20分鐘)。用無(wú)菌水沖洗5遍,然后將種子點(diǎn)到MS培養基上,pH5.9,另加0.9%瓊脂以及2%蔗糖。
2、把種子放到4℃黑暗條件下進(jìn)行春化48h-72h左右,在長(cháng)日照或短日照條件下催芽,。利用PLC控制器,編輯簡(jiǎn)單的晝夜模式,設定光照時(shí)間16小時(shí)(黑暗8小時(shí))或者光照14小時(shí)(黑暗10小時(shí));選配Q23+連續光強調節裝置,設定光照強度為100-150umol/m2.s;設定室內溫度為光照條件下20-22℃,黑暗條件下18-20℃;選配濕度控制系統,設定室內相對濕度70%。
3、出苗大約7~10天,然后移入土中培養,采用底部灌溉方式澆水(利用土壤的毛細作用)。在*次澆水前,可使土壤*干燥,以后每隔7~10天澆一次水。
4、土壤可用營(yíng)養土、蛭石以及珍珠巖比例10:1:1的比例配置,也可直接用堆肥、蛭石以及草炭等進(jìn)行混合。在生長(cháng)過(guò)程中,可用普通的花肥施肥一次或者不施肥。
5、當植株長(cháng)到一定高度時(shí),可剪斷莖桿,以產(chǎn)生更多的花序,可用于轉化研究或者獲得更多的種子。
擬南芥培養箱特殊培養
為了加快擬南芥生長(cháng)速度,在移入土壤培養后,可設定長(cháng)日照,利用PLC控制器,編輯程序設定24h光照,光強100-250umol/m2.s,溫度持續22-23℃。
擬南芥根系處理培養,可減少光照時(shí)間為8-12h,提高光照強度為100-350umol/m2.s,溫度為光照條件下22-23℃,黑暗條件下18-20℃,其余培養條件同正常培養。